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Mallas fibrosas a base de yodo con electrohilado in situ para apósitos antibacterianos para heridas

Resumen

Para una aplicación eficaz de mallas fibrosas electrohiladas y electrohiladas en vendajes, tenemos poli (vinil pirrolidona) / yodo (PVP / I), PVP / poli (vinil pirrolidona) -yodo (PVPI) electrohilado in situ y poli (vinil butiral) ) (PVB) / PVPI en membranas fibrosas mediante un aparato de electrohilado manual. Las morfologías de las fibras electrohiladas se examinaron mediante SEM y también se investigaron la hidrofobicidad, la permeabilidad a los gases y las propiedades antibacterianas de las mallas hiladas. La flexibilidad y viabilidad de las membranas PVP / I, PVP / PVPI y PVB / PVPI de electrohilado in situ, así como las excelentes permeabilidades a los gases y las propiedades antibacterianas de las mallas tal como se hilan, prometían sus aplicaciones potenciales en la cicatrización de heridas.

Antecedentes

Gracias a las ventajas de la fácil producción a gran escala, la enorme relación superficie-volumen, la alta porosidad y las estructuras internas sintonizables [1, 2, 3, 4], las mallas fibrosas electrohiladas han atraído muchos intereses en varios campos. tales como filtración [5, 6], atención médica [7,8,9,10,11,12] y energía [13, 14]. Las membranas fibrosas electrohiladas son adecuadas para el vendaje de heridas debido a sus estructuras a nanoescala que imitan las fibrillas de colágeno de la matriz extracelular nativa y los órganos humanos [9, 11], y luego, las mallas recién hiladas no solo pueden proteger físicamente la herida de los contaminantes y infecciones, sino que también proporcionan un entorno ideal para la regeneración de la piel mediante el mantenimiento de un intercambio adecuado de gases, además de promover la fase de hemostasia y evitar la inducción de cicatrices [9, 11, 12].

Entre los miles de materiales electrohilados adecuados, la poli (vinilpirrolidona) (PVP) y el poli (vinil butiral) (PVB) son dos polímeros importantes por su excelente biocompatibilidad, no toxicidad, buena solubilidad en alcohol, etc. [15,16,17 , 18]. En consecuencia, los materiales fibrosos de PVP y PVB recién hilados se han aplicado popularmente para vendajes de heridas [18,19,20]. Además, la PVP en combinación con yodo forma un complejo llamado PVP-yodo (PVPI) y ha sido un desinfectante altamente eficiente y ampliamente utilizado por su pequeña estimulación, baja toxicidad, contaminación lumínica, efecto bactericida de amplio espectro y no resistencia de los microorganismos para incluso desde hace mucho tiempo usando [21,22,23,24]. Sin embargo, PVPI no se recomienda para uso a largo plazo o para heridas complejas [25]. Las fibras electrohiladas basadas en PVP-I pueden ser una solución útil y han sido informadas por varios grupos [26,27,28,29,30,31,32,33]. Ignatova y col. había preparado fibras de PVPI o poli (óxido de etileno) (PEO) / PVP-I mediante electrohilado directo de soluciones de PVPI o PEO / PVP-I o reticulando esteras de PVP y PEO / PVP y tratándolas con vapor de yodo o con una solución de yodo [26]. Wang había fabricado nanofibras de PVPI mediante electrohilado de soluciones de PVP, yodo y etanol absoluto, y la caracterización de fibras recién hiladas a partir de espectros infrarrojos, espectros Raman y difracción de rayos X asegura la formación del complejo PVPI [27]. Uslu y col. han informado de una serie de fibras electrohiladas basadas en PVPI como el poli (alcohol vinílico) (PVA) / PVPI [28], fibras de PVA / PVPI / poli (etilenglicol) (PEG) que contienen (hidroxipropil) metilcelulosa (HPMC) y aloe vera [29], nanofibras de PVA / PVPI con quitosano y poloxámero adicional 188 [30], y fibras de PVA / poli (ácido acrílico) (PAA) / PVPI [31]. Se sabía que todas estas fibras de PVPI mostraban aplicaciones potenciales en apósitos para heridas, sin embargo, se centraban principalmente en las morfologías y la estabilidad térmica de las fibras / mallas recién hiladas. Hong y col. han informado PLLA / PVPI / TiO 2 Telas no tejidas fibrosas ultrafinas multicomponente por electrohilado y tratamiento con vapor de yodo [32]. Se encontró que la existencia de PVPI dotó a la tela no tejida de capacidad de absorción de agua, actividad antimicrobiana, capacidad adhesiva y característica transformable de hidrofilicidad a no hidrofilia. Sebe y col. han preparado PVP / poli (vinilpirrolidona-acetato de vinilo) / nanofibras de yodo con diferentes proporciones de polímeros mediante una técnica de hilado rotatorio de alta velocidad. Excepto por el análisis morfológico detallado, también se investigaron la estructura supramolecular y la actividad antimicrobiana de las esteras obtenidas, lo que sugirió las aplicaciones potenciales en vendajes para heridas [33]. Sin embargo, para aplicaciones prácticas, estas fibras electrohiladas de PVPI solo se pueden fabricar sobre la base de modelos prediseñados y luego implantarse en la herida del paciente, lo que puede dar lugar a segundas lesiones en la herida. El electrohilado in situ podría resolver este problema.

En este artículo, tenemos soluciones de PVP y PVB a base de yodo electrohilado in situ en mallas fibrosas mediante un aparato de electrohilado portátil de mano. Se examinaron la morfología, hidrofobicidad, permeabilidad a los gases y propiedad antibacteriana de las mallas recién hiladas. Además, también se investigaron los efectos de las concentraciones de yodo sobre estas propiedades. Además, se presentó la flexibilidad y la viabilidad de los tapetes fibrosos a base de yodo electrohilado in situ y, luego, se puede esperar la aplicación para vendajes para heridas.

Métodos / Experimental

Materiales

Se disolvió polivinilpirrolidona (PVP, 250 kDa, Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd., China) en etanol (Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd., China) al 13% en peso. Se disolvió poli (vinil butiral) (PVB) (100 kDa, Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd., China) en alcohol etílico al 10% en peso. Se añadió yodo (reactivo analítico, Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd., China) a soluciones de PVP / etanol a una concentración de 1% en peso, 2% en peso y 5% en peso, respectivamente. El complejo de poli (vinilpirrolidona) -yodo (PVPI, Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd., China) se disolvió en las soluciones de PVP / etanol y PVB / etanol al 1% en peso, 2% en peso y 5% en peso, respectivamente. Las soluciones del complejo se agitaron a temperatura ambiente con agitación constante durante al menos 24 h antes del electrohilado. El fluido corporal simulado modificado (SBF) se adquirió de Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd., China.

Proceso de electrohilado

Las soluciones preparadas se colocaron en una jeringa de 5 ml equipada con una boquilla con un diámetro de 0,1 mm y luego se cargaron en el aparato de electrohilado portátil de mano (HHE-1, Qingdao Junada Technology Co., Ltd), como se muestra en Figura 1a. El alto voltaje de este dispositivo es de aproximadamente 10 kV fijo [34, 35]. Durante el proceso de electrohilado in situ, primero se puede operar el dispositivo y luego presionar la jeringa con un dedo. Las fibras recién hiladas se pueden fabricar y luego depositar sobre el colector, como se sugiere en la Fig. 1b. Los chorros de electrohilado de este dispositivo pueden ser captados por una cámara de alta velocidad, que se muestra en la Fig. 1c. Para los exámenes adicionales de las mallas fibrosas electrohiladas in situ, también electrohilamos in situ estas fibras sobre un colector de papel de aluminio con una distancia de 8 cm. Las mallas recolectadas se destaparon del papel de aluminio para una caracterización adicional.

El aparato de electrohilado de mano ( a ) y el proceso de electrohilado in situ ( b ). Los chorros de electrohilado se pueden ver desde la hilera ( c )

Caracterización

La morfología y el sistema de dispersión de energía (EDS) de las fibras recién hiladas se examinaron con un microscopio electrónico de barrido (SEM, Phenom ProX, Phenom Scientific Instruments Co., Ltd., China) a 10 kV, y todas las muestras se recubrieron con oro. durante 30 s antes del análisis. Los espectros de espectroscopía infrarroja por transformada de Fourier (FTIR) se midieron mediante un espectrómetro Thermo Scientific Nicolet iN10. El ángulo de contacto del fluido corporal simulado (SBF) fue examinado por un analizador de ángulo de contacto (JY-PHb, China) con una gota de SBF de 2 μl. Según la norma ASTM D 737, la permeabilidad al aire bajo una caída de presión de 200 Pa fue probada por un probador de permeabilidad al aire (Textest FX3300). PSM 165 (Alemania, Topas GmbH, PSM 165) examinó los tamaños de los poros de las mallas fibrosas recién hiladas a una presión de 200 Pa. Las propiedades antibacterianas de las mallas recién hiladas se investigaron contra Escherichia coli ( E. coli , ATCC 10536) y Staphylococcus aureus ( S. aureus , ATCC 25923) bacterias. Células bacterianas de E. coli (ATCC 10536) y S. aureus (ATCC 25923) se cultivaron durante 24 h en un agitador a 37 ° C y 100 rpm.

Resultados y discusión

Morfologías de fibras electrohiladas

Con el aparato HHE-1 como se muestra en la Fig. 1, las soluciones preparadas de PVP / I, PVP / PVPI y PVB / PVPI pueden electrohilarse en fibras convenientemente. Las morfologías de las fibras asféricas se pueden encontrar a partir de las imágenes SEM que se muestran en la Fig. 2. A partir de las imágenes SEM, obviamente se puede encontrar que las fibras electrohiladas mostraban superficies lisas, mientras que los diámetros de las fibras as hiladas mostraban distribuciones diferentes porque de los diferentes materiales y concentraciones. Combinando imágenes SEM y los datos en la Tabla 1 de manera integral, se muestra que para las fibras PVP / I, a medida que aumenta la concentración de yodo, el diámetro promedio de las fibras as-hiladas disminuyó obviamente, lo que puede deberse a la mayor conductividad de las soluciones. a medida que se añade yodo [36]. Mientras que para PVP / PVPI y PVB / PVPI, los diámetros promedio de las fibras recién hiladas aumentaron con una mayor concentración de PVPI, lo que puede resultar del aumento de viscosidades de las soluciones mezcladas [37].

Imágenes SEM de las fibras PVP / I (a1 – a4), PVP / PVPI (b1 – b4), PVB / PVPI (c1 – c4) recién hiladas con concentraciones de I o PVPI de 0%, 1%, 2% y 5%, respectivamente

EDS y FTIR

Para lograr las propiedades antibacterianas y luego beneficiar la aplicación de curación de heridas, el yodo jugó un papel crucial en las fibras electrohiladas. Para verificar la existencia de yodo, se examinó EDS en el modelo de análisis de espectro completo. Como se muestra en la Fig.3, elegimos las fibras recién hiladas con concentraciones más altas de I / PVPI, 5%, por ejemplo, y las imágenes mostraron que en cada tipo de fibras electrohiladas, excepto en las principalmente de carbono (Fig.3 ( a1), (b1) y (c1)) y oxígeno (Fig.3 (a2), (b2) y (c2)) elementos en los polímeros, también se observó un elemento extra de yodo (Fig.3 (a3), (b3) y (c3)). Además, el yodo añadido a las soluciones de PVP mostró directamente una alta concentración de yodo además del PVPI añadido. Aunque se pudo encontrar yodo en las imágenes de EDS, obviamente se puede encontrar en la Fig. 3 que el contenido de yodo es pequeño en comparación con otros elementos. La misma conclusión se puede obtener de los espectros FTIR en la Fig. 4.

Diferentes elementos de las imágenes EDS de las fibras PVP / I (a – a3), PVP / PVPI (b – b3), PVB / PVPI (c – c3) hiladas con un 5% de dopaje I / PVPI

Espectros FTIR de las fibras recién hiladas PVP / I ( a ), PVP / PVPI ( b ), PVB / PVPI ( c )

La Fig. 4a-c mostró los espectros FTIR de las fibras recién hiladas con diferente concentración de diferentes adiciones. Como puede verse en la Fig. 4, las adiciones de yodo o PVPI no cambian las estructuras químicas de los polímeros obviamente, lo que puede deberse a la pequeña cantidad de adiciones. Los polímeros inalterados también aseguraron la estabilidad de los polímeros para la cicatrización de heridas, sin ninguna otra incertidumbre.

Mojabilidad

Además, se creía que un apósito ideal para heridas debería incluir algunas ventajas como el mantenimiento de la hidratación de la herida y la absorción del exceso de exudado de la herida, lo que puede requerir la humectabilidad del apósito para heridas diseñado [5, 7, 8, 9]. En consecuencia, también examinamos la hidrofilia de las mallas fibrosas recién hiladas midiendo sus ángulos de contacto SBF. Como se sugiere en la Fig. 5, los tres tipos de membranas fibrosas electrohiladas exhibieron todas una buena hidrofilia con la concentración creciente de yodo y PVPI. Para las mallas basadas en PVP, debido a la hidrofilia del polímero, las mallas fibrosas electrohiladas también establecieron pequeños ángulos de contacto SBF, y el ángulo aumentó a 19,5 ° para PVP / I, como se muestra en la Fig. 5 (a-a3) y ( b – b3). El aumento de los ángulos de contacto del SBF puede deberse al aumento de la rugosidad de la superficie de estas mallas. Sin embargo, el caso de las mallas basadas en PVB fue diferente. En nuestro estudio anterior, se había señalado que las mallas fibrosas de PVB electrohilado mostraban hidrofobicidad debido a sus estructuras desiguales [38]. En ausencia de PVPI, las mallas electrohiladas de PVB mostraron el caso de ángulo de contacto similar como se puede ver en la Fig. 5 (c). Como PVPI está dopado en PVB, el ángulo de contacto SBF disminuyó y rápidamente a cero con PVPI superior al 2%, lo que indicó que PVPI aumentó la hidrofilicidad de las mallas fibrosas recién hiladas. La buena hidrofilia de estas mallas fibrosas aseguró la capacidad de absorción del exceso de exudado de la herida y luego sería beneficioso para las aplicaciones de apósitos para heridas.

Examen de contacto SBF de las fibras recién hiladas PVP / I (a – a3), PVP / PVPI (b – b3), PVB / PVPI (c – c3) con diferentes concentraciones de yodo / PVPI

Permeabilidad al aire

Un apósito ideal para heridas también requiere una buena permeabilidad al aire para proporcionar un entorno positivo para la cicatrización de heridas [9, 11,12,13]. Aquí, también investigamos la permeabilidad al aire de este tipo de mallas fibrosas dopadas con yodo, como se muestra en la Tabla 2. Como se puede encontrar en la Tabla 2, con el aumento del dopaje de yodo en PVP, la permeabilidad al aire también se incrementó de 59,92 a 324,3 mm s −1 , que puede resultar de la disminución del diámetro y el aumento de la porosidad, mientras que la permeabilidad al aire de las mallas fibrosas con PVPI dopado en PVP y PVB no muestra tendencias obvias. Sin embargo, los dopantes al 5% muestran una mejor permeabilidad a los gases que los polímeros puros. A modo de comparación, también probamos la permeabilidad al aire de dos apósitos para heridas tradicionales (TWD) comprados en el mercado. Está claro que los apósitos para heridas fibrosos electrohilados diseñados establecen una mejor permeabilidad al aire que los del mercado.

Para un examen más detallado de la permeabilidad al aire, probamos el tamaño de los poros y la distribución de los poros de las mallas recién hiladas. Como se muestra en la Tabla 3, se enumeraron los tamaños de poro promedio de las mallas recién hiladas. En general, cuanto mayor es el tamaño medio de los poros, mejor es la permeabilidad al aire, en comparación con los datos de la Tabla 2. Además, los tamaños de los poros de las mallas fibrosas recién hiladas eran principalmente uniformes, con la porción más grande en los tamaños medios, que pueden ser que se encuentra en el archivo adicional 1:Figura S1. Los tamaños de poro de estas mallas electrohiladas estaban en la región de 1,936 a 9,152 μm, coincidiendo con los tamaños de las células de tejido humano, lo que sería beneficioso para la cicatrización de heridas. Sin embargo, debido a la precisión del instrumento, el tamaño de los poros del TWD era demasiado pequeño para ser probado, lo que puede resultar en una mala permeabilidad al aire.

Actividad antibacteriana

Otro requisito para un apósito ideal para heridas es la asepsia e incluso la antibiosis para prevenir y tratar las infecciones de las heridas [11,12,13]. En este trabajo, el dopaje con yodo y PVPI tienen razón para lograrlo. Las actividades antibacterianas de las mallas fibrosas recién hiladas se evaluaron frente a bacterias patógenas típicas, como E. coli y S. aureus , como se muestra en la Fig. 6. A partir de la Fig. 6, se puede encontrar que no se formó un círculo bacteriostático para PVP o PVB puros. Una vez que se dopó yodo o PVPI en el polímero, las membranas fibrosas recién hiladas mostraron zonas de inhibición obvias para las dos cepas bacterianas después de intervalos de 24 h. Además, la PVP dopada con yodo mostró las mejores propiedades antibacterianas frente a E. coli y S. aureus , el PVP dopado con PVPI ocupando el segundo lugar y el PVB / PVPI en último lugar. Las buenas propiedades antibacterianas aseguraron que las mallas fibrosas electrohiladas a base de yodo pudieran usarse para la cicatrización de heridas contra infecciones bacterianas de la herida. Además, se puede esperar que cuanto mayor sea la concentración de los antibacterianos adicionales, mejores serán las propiedades antibacterianas de las mallas. En consecuencia, se pueden obtener fácilmente mejores propiedades antibacterianas agregando más yodo o PVPI en sus soluciones.

La actividad antibacteriana de las membranas recién hiladas contra E. coli y S. aureus

Aplicaciones in situ

Se cree que el apósito para heridas in situ beneficiará su eficacia debido a una superioridad adicional, como la adaptabilidad sin arrugas ni estrías en el lecho de la herida, la facilidad de aplicación y la mejora del cumplimiento y la comodidad del paciente [39]. En consecuencia, el electrohilado in situ se considera un concepto útil para producir sustitutos adecuados para la reparación de tejidos y la cicatrización de heridas directamente sobre la lesión del paciente, independientemente del tamaño y la profundidad de la herida [18, 34, 35, 40, 41]. Como se muestra en la Fig. 7a, b, las mallas fibrosas a base de yodo se pueden electrohilar in situ sobre la "mano lesionada" mediante el dispositivo HHE-1 y formar una película delgada en la superficie de la piel como una segunda capa de piel debido a las fuerzas de atracción electrostática. La membrana fibrosa electrohilada de PVP-I muestra buena flexibilidad y compacidad y se puede quitar fácilmente si es necesario (ver Fig. 7c, d). Los detalles más vívidos del electrohilado in situ del apósito para heridas PVP-I se pueden encontrar en el archivo adicional 1:Video S1 y S2 y Figura S2.

Aplicaciones in situ del aparato de mano y de las esteras fibrosas electrohiladas a base de yodo. Con el HHE-1, uno puede fácilmente colocar PVP / I a base de yodo electrohilado in situ en la "mano lesionada" ( a - b ), las alfombrillas electrohiladas se pueden quitar fácilmente del "lecho de la herida" ( c - d )

Conclusiones

En resumen, hemos electrohilado in situ PVP / I, PVP / PVPI y PVB / PVPI en membranas fibrosas mediante un aparato de electrohilado manual. Estas mallas electrohiladas muestran diámetros uniformes y mejor hidrobilicidad con dopaje de yodo o PVPI. Además, la buena permeabilidad al aire de las mallas electrohiladas PVP / I, PVP / PVPI y PVB / PVPI asegura su aplicación en vendajes para heridas. Las mayores concentraciones de yodo y su complejo favorecen las propiedades antibacterianas de estas mallas y luego mejoran los efectos como apósito para heridas. Además, el electrohilado in situ también beneficia al proceso de electrohilado y las mallas fibrosas recién hiladas para la cicatrización de heridas.

Abreviaturas

E. coli :

Escherichia coli

EDS:

Sistema de dispersión de energía

FTIR:

Espectroscopia infrarroja por transformada de Fourier

HPMC:

(Hidroxipropil) metilcelulosa

PAA:

Poli (ácido acrílico)

PEG:

Polietilenglicol

PEO:

Poli (óxido de etileno)

PVA:

Poli (alcohol vinílico)

PVB:

Polivinílico (butiral de vinilo)

PVP:

Poli (vinilpirrolidona)

PVP / I:

Poli (vinilpirrolidona) / yodo

PVPI:

Poli (vinilpirrolidona) -yodo

S. aureus :

Staphylococcus aureus

SEM:

Microscopio electrónico de barrido

WCA:

Ángulo de contacto con el agua (WCA)


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