Nanopartículas de Fosfuro de Cobalto: Un Electrocatalizador Robusto para Detección Sensible y Enzimática de Peróxido de Hidrógeno

Resumen

En este trabajo, nanopartículas de fosfuro de cobalto (Co₂P NPs) se prepararon mediante un método hidrotérmico simple y suave sin usar fuente de fósforo dañina. La estructura morfológica y componente superficial de Co₂P se caracterizaron mediante microscopía electrónica de transmisión, difracción de rayos X y espectroscopía fotoelectrónica de rayos X. Considerando la excelente actividad electrocatalítica de reducción y buena conductividad eléctrica del fosfuro de metal de transición, fabricamos Co₂P NPs en sustrato de óxido de indio y estaño (ITO) (Co₂P/ITO) para detección de H₂O₂. El transductor Co₂P/ITO mostró una respuesta amperométrica rápida menor a 5 s, un rango de respuesta más amplio de 0,001 a 10,0 mM y un límite de detección bajo de 0,65 μM. Además, el sensor Co₂P/ITO no enzimático mostró selectividad, reproducibilidad, repetibilidad y estabilidad sobresalientes, lo que califica al electrodo Co₂P/ITO como un biosensor bastante confiable y prometedor para detección de H₂O₂.

Introducción

El peróxido de hidrógeno (H₂O₂) es una especie reactiva de oxígeno representativa en organismos vivos, y juega un papel crítico en la función fisiológica normal [1]. La concentración de H₂O₂ en células vivas está estrechamente relacionada con el equilibrio fisiológico celular [2]. Numerosos estudios también han reportado que cáncer, enfermedades de Alzheimer, Parkinson y algunas enfermedades graves pueden ser causadas por concentración anormal de H₂O₂ [3,4,5]. Desarrollar métodos precisos, sensibles, rápidos y selectivos para detectar la concentración de H₂O₂, un biomarcador normal de estrés oxidativo, será indudablemente beneficioso para el diagnóstico temprano. Hasta ahora, una gran cantidad de métodos analíticos como espectroscopía [6], colorimetría [7], fluorescencia [8, 9] y métodos electroquímicos [10,11,12] se han aplicado en determinación de H₂O₂. El método electroquímico, especialmente la prueba amperométrica, se está convirtiendo gradualmente en uno de los métodos de detección más simples y efectivos para análisis biológico de H₂O₂ entre diversos métodos de detección debido a sus ventajas como alta sensibilidad, selectividad sobresaliente y bajo costo.

Los sensores electroquímicos enzimáticos han demostrado ser instrumentos efectivos para detectar H₂O₂. Sin embargo, la aplicación práctica a gran escala de sensores basados en enzimas está limitada por inmovilización complicada, inestabilidad ambiental y baja reproducibilidad. Por tanto, desarrollar sensores electroquímicos no enzimáticos de H₂O₂ es altamente indispensable.

En años recientes, un número creciente de sensores basados en metales nobles [13,14,15], metales no nobles y sus compuestos correspondientes [16,17,18,19] o materiales de carbono [20, 21] se han usado para detección electroquímica de H₂O₂. Como materiales electroquímicamente activos para fabricar biosensores no enzimáticos, los compuestos de metales de transición han recibido intereses crecientes. Los fosfuros de metales de transición (TMPs) son una clase de materiales recién desarrollados con excelente actividad electrocatalítica, buena conductividad eléctrica y muchas propiedades sobresalientes. Por tanto, se han estudiado extensivamente para aplicaciones en división de agua [22, 23], hidrodesulfuración [24], y electrodos de supercondensadores [25]. Investigaciones recientes indican que CoP, Ni₂P y Cu₃P [26,27,28] también pueden usarse como electrocatalizadores eficientes para detección no enzimática de H₂O₂. Sin embargo, el número de investigaciones sobre aplicación de TMPs en bioanálisis sigue siendo limitado hoy en día. Además, el uso de trifenilfosfina [29, 30], fósforo blanco [31, 32] u otras fuentes de fósforo peligrosas para el medio ambiente [33] puede aumentar el riesgo operacional en la preparación de TMPs. Por tanto, algunos trabajos de investigación para desarrollar métodos verdes en preparación de TMPs vale la pena complementar en esta área.

En este trabajo, nanopartículas de fosfuro de cobalto (Co₂P NPs) se prepararon mediante método hidrotérmico de un paso utilizando acetato de cobalto y fósforo rojo como materias primas. Aquí, fabricamos Co₂P NPs en sustrato de óxido de indio y estaño (ITO) por método de gota para detección de H₂O₂. Co₂P mostró excelente actividad electrocatalítica hacia reducción de H₂O₂. Además, reveló selectividad favorable, excelente reproducibilidad y buena estabilidad, exhibiendo así su potencial aplicación como plataforma sensible para detección de H₂O₂.

Sección Experimental

Reactivos y Materiales

Todos los reactivos fueron grado analítico y usados sin purificación adicional. Acetato de cobalto (II) tetrahidratado (Co(Ac)₂·4H₂O), cloruro de cobalto hexahidratado (CoCl₂·6H₂O), D-(+)-glucosa, L-Glicina (L-Gly), ácido ascórbico (AA), ácido úrico (UA), urea, NaCl, KCl, NaH₂PO₄, Na₂HPO₄, peróxido de hidrógeno (30% H₂O₂), etanol y acetona se compraron de Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd. China. D-(–)-fructosa, L-arginina (L-Arg), L-lisina (L-Lys), dopamina (DA), paracetamol (APAP), ácido aminotrimetileno fosfónico (ATMP, 50% p/p) se compraron de Aladdin Ltd. Fósforo rojo comercial (98,5%, 100 malla) se compró de Energy Chemical Technology (Shanghai) Co., Ltd. Dispersión de polímero Nafion PFSA (5%) se compró de Beijing Honghaitian technology Co., Ltd. Agua desionizada se usó en todos los experimentos. El vidrio de óxido de indio y estaño (ITO) (10 × 20 × 1,1 mm con película ITO de 185 ± 2 nm y resistencia superficial de 6,6 ± 0,1 Ω) fue suministrado por Shenzhen South Xiangcheng Technology Co., Ltd.

Síntesis de Nanopartículas Co₂P

Fósforo rojo comercial (2 g) se dispersó en 15 mL H₂O bajo sonificación e hidrotérmicamente tratado a 200 °C por 12 h en un autoclave de acero inoxidable de 50 mL con revestimiento de Teflón para limpiar capas de óxido [34]. Luego, el fósforo rojo tratado hidrotérmicamente se secó en horno de vacío. Tras finalizar el pretratamiento del fósforo rojo, 1 mmol Co(Ac)₂·4H₂O se disolvió en 30 mL agua destilada para obtener solución acuosa. Luego, el fósforo rojo tratado hidrotérmicamente se añadió a la solución bajo ultrasonicación por 15 min con relación molar Co/P 1/10. La suspensión preparada se vertió rápidamente en un autoclave de 50 mL con revestimiento de Teflón. Luego, el autoclave se colocó en horno electrónico e hidrotérmicamente tratado a 160, 200, 240 °C por 12 h, respectivamente. Luego, el producto se recogió por centrifugación y lavó tres veces con agua destilada y etanol, respectivamente. Finalmente, Co₂P NPs se secaron a 60 °C por 3 h en aire.

Síntesis de Co(PO₃)₂

El método de preparación de Co(PO₃)₂ se refirió a reporte previo [35]. Se preparó primero solución de metanol 0,1 M CoCl₂·6H₂O. Luego, 2 mL ATMP (50 % p/p) se añadieron gota a gota en 20 mL la solución púrpura anterior y se agitó por 30 min. El polímero de coordinación insoluble de cobalto-metafosfato se formó en la solución subsiguientemente. El polvo rosa obtenido se calentóさらに a 900 °C bajo flujo de Ar con velocidad de calentamiento de 5 °C·min⁻¹ y luego se mantuvo por 2 h. Tras enfriar a temperatura ambiente, el producto negro se recogió y recalentó a 650 °C por 4 h en aire para eliminar ligando orgánico carbonizado. Finalmente, se obtuvo polvo púrpura claro de Co(PO₃)₂.

Fabricación de Electrodo Co₂P/ITO

Primero, el vidrio ITO (1 cm × 2 cm) se limpió en acetona, etanol y agua desionizada por 10 min, respectivamente, por sonicación. Después, el ITO tratado se secó bajo barrido de nitrógeno. Para modificación del electrodo, 5 mg de Co₂P NPs se dispersaron en 1 mL agua desionizada para formar suspensión Co₂P de 5 mg mL⁻¹. Luego, 5 μL solución Nafion 5% se añadieron a la suspensión y la mezcla se ultrasonificó por 15 min para obtener suspensión uniforme tipo tinta. El electrodo Co₂P/ITO se preparó depositando 100 μL de suspensión Co₂P en la superficie ITO, y secando en aire como electrodo de trabajo. El proceso esquemático de preparación del electrodo Co₂P/ITO se muestra en Esquema 1.

Nanopartículas de Fosfuro de Cobalto: Un Electrocatalizador Robusto para Detección Sensible y Enzimática de Peróxido de Hidrógeno — Preparación esquemática del electrodo Co₂P/ITO y detección de H₂O₂

Caracterizaciones

Los datos de difracción de rayos X (XRD) se analizaron con un difractómetro D8 ADVANCE con radiación Cu Kα. La medición de microscopía electrónica de transmisión (TEM) se realizó usando un Tecnai G2 F20 con detector de espectro de energía dispersa. Los espectros de espectroscopía fotoelectrónica de rayos X (XPS) se midieron en un espectrómetro Thermo ESCALAB 250XI.

Mediciones Electroquímicas

Las mediciones voltamétricas se realizaron con estación de trabajo electroquímica CHI 660E en sistema de tres electrodos, empleando electrodo Co₂P/ITO como electrodo de trabajo, lámina de platino (1 cm × 1 cm) como contraelectrodo y Ag/AgCl con solución KCl 3 M como electrodo de referencia para estudiar actividades electroquímicas de muestras sintetizadas para detección de H₂O₂. Solución salina fosfatada (PBS; 0,1 M, pH 7,4) se usó como electrolito para simular medio fisiológico en cuerpo humano. Los rendimientos de detección del electrodo Co₂P/ITO hacia H₂O₂ se investigaron por voltametría cíclica (CV) y amperometría (I-t). Todos los experimentos de detección se realizaron bajo agitación 100 rpm a temperatura ambiente. Pruebas de impedancia electroquímica se realizaron en estación de trabajo electroquímica VersaSTAT 3F y solución de ferricianuro se usó como electrolito para medición de impedancia.

Resultados y Discusión

Caracterización de Co₂P NPs

La estructura cristalina de Co₂P NPs se confirmó por medición XRD. La Figura 1a muestra patrones XRD de muestras Co₂P preparadas a 160, 200 y 240 °C por 12 h. La muestra Co₂P preparada a 200 °C muestra picos de difracción alrededor de 40,7°, 40,9°, 52,0° y 56,2° que corresponden a planos de difracción característicos en (121), (201), (002) y (320) para fase ortorrómbica de Co₂P (JCPDS no. 32-0306). Cuando la temperatura varió de 160 a 200 °C, las intensidades de picos de difracción aumentaron y los picos se volvieron más estrechos y agudos, indicando que los productos tenían mayor cristalinidad a 200 °C. Sin embargo, cuando la temperatura alcanzó 240 °C, se formaron algunas impurezas y el pico de difracción a 29,7° se atribuyó al plano de difracción en (-222) de Co(PO₃)₂ (JCPDS no. 27-1120). La influencia del tiempo de síntesis en preparación de Co₂P bajo 200 °C se muestra en Archivo adicional 1: Fig. S1. Cuando la duración del tiempo se controló dentro de 12 h, los Co₂P NPs obtenidos mostraron el valor más bajo de ancho a mitad de altura del pico (121), sugiriendo mejor cristalinidad. Además, ninguna impureza existió en la muestra cuando el tiempo de reacción varió de 6 a 24 h. Según la fórmula de Scherrer, el tamaño de grano calculado de Co₂P NPs preparadas a 200 °C por 12 h fue 14,2 nm.

La morfología de Co₂P NPs se evaluó por mediciones TEM. Como se muestra en Fig. 1b, el producto preparado a 200 °C está compuesto de nanopartículas irregulares con diámetro alrededor de 10–20 nm y dos franjas de red se ven claramente en imagen TEM de alta resolución (HRTEM) (inset en Fig. 1b). La distancia entre planos vecinos es 0,22 nm, correspondiente a facetas (121) de Co₂P, lo que confirma además que la formación de TMP es Co₂P.

La técnica XPS se empleó en análisis de composiciones químicas en superficie de Co₂P. Archivo adicional 1: Fig. S2 muestra espectro de barrido XPS de Co₂P. Elementos Co, P y O se detectaron en la muestra, confirmando existencia de Co₂P y algunos productos oxidados. Espectros de espectroscopía de rayos X dispersiva en energía (EDX) de Co₂P (Archivo adicional 1: Fig. S3) confirman además la co-existencia de tres elementos (Co, P, O) en la muestra. Los espectros XPS de alta resolución de Co 2p y P 2p se muestran en Fig. 1c, d, respectivamente. En espectro Co 2p, los picos a 781,1 y 797,6 eV se atribuyen a energías de enlace (BEs) de Co²⁺ 2p_3/2 y Co²⁺ 2p_1/2, respectivamente [26, 36]. Los picos a 786,0 y 803,1 eV son dos picos satélite de shake-up aparentes. El BE Co 2p de 778,2 eV se desplaza positivamente desde el de Co metálico (777,9 eV), sugiriendo que Co en Co₂P tiene carga parcial positiva (δ⁺) con valor pequeño (0 < δ < 2) [37]. Por el contrario, el BE P 2p de 129,4 eV se desplaza negativamente desde el de P elemental (130,2 eV) de modo que P tiene carga parcial negativa (δ⁻) en Co₂P. Los cambios de BE en elementos Co y P comparados con sus sustancias elementales, respectivamente, revelan que la dirección de transferencia de densidad electrónica en Co₂P es de Co a P [38]. La oxidación superficial de Co₂P genera algunas especies de P oxidado en la muestra. Por tanto, los picos a 133,2 eV en rango de BE alto se asignan a óxidos [39].

Detección Electroquímica de H₂O₂ en Electrodo Co₂P/ITO

Para investigar la actividad electrocatalítica de Co₂P NPs en reducción de H₂O₂, diseñamos un electrodo no enzimático de H₂O₂ depositando suspensión Co₂P NPs en superficie ITO desnuda. La Figura 2a muestra curvas CV de ITO desnudo y Co₂P/ITO en 0,1 M PBS a pH 7,4 con y sin 5,0 mM H₂O₂, respectivamente. Las líneas punteadas indican que la respuesta de ITO desnudo a reducción de H₂O₂ es despreciable. Sin embargo, el electrodo Co₂P/ITO exhibe un pico de reducción notable a −0,5 V en presencia de H₂O₂, demostrando la prominente actividad electrocatalítica de Co₂P NPs hacia reducción de H₂O₂. La Figura 2b presenta curvas CV de Co₂P/ITO a diferentes velocidades de barrido (30 a 100 mV s⁻¹) con 2,5 mM H₂O₂. Al aumentar la velocidad de barrido, la corriente de pico de reducción aumentó y el potencial de pico se desplazó al lado de potencial más negativo, indicando que la reducción de H₂O₂ en Co₂P/ITO fue una reacción irreversible. La curva de calibración correspondiente (inset, Fig. 2b) muestra que las densidades de corriente de pico de reducción aumentan linealmente proporcionales a la velocidad de barrido, sugiriendo que la reducción electroquímica de H₂O₂ en superficie del electrodo Co₂P/ITO es un proceso controlado por superficie [40].

Las Figuras 2c, d muestran la respuesta amperométrica y curva de calibración del electrodo Co₂P/ITO tras adición sucesiva de H₂O₂ en 0,1 M PBS a −0,5 V con agitación. El electrodo Co₂P/ITO exhibió respuesta rápida a la adición de H₂O₂ y alcanzó corriente de estado estable dentro de 5 s. La curva de calibración en Fig. 2d muestra que el transductor muestra un rango multi-lineal de concentración H₂O₂ de 0,001 a 1,0 mM, 1,0–5,0 mM y 5,0–10,0 mM. La sensibilidad del sensor altera con el aumento de concentración H₂O₂, debido al cambio de cinética de reducción electrocatalítica de H₂O₂ en superficie del electrodo. Según reportes previos, el paso determinante de velocidad de reducción de H₂O₂ está dominado por adsorción de H₂O₂ a baja concentración, mientras que la activación de H₂O₂ es el determinante principal a alta concentración. En la región media, la cinética de reducción de H₂O₂ está controlada por adsorción y activación al mismo tiempo [10]. Una multitud de analitos se adsorberán en superficie de Co₂P y cubrirán sitios activos en alta concentración, lo que conduce a disminución de sensibilidad [41].

La comparación de rendimientos de detección H₂O₂ de la muestra Co₂P preparada a diversas temperaturas y tiempos de reacción se muestra en Archivo adicional 1: Fig. S4, S5 y Tabla S1, indicando que la muestra Co₂P preparada a 200 °C por 12 h muestra los mejores rendimientos de detección H₂O₂. Cuando la temperatura de reacción subió a 240 °C, el Co(PO₃)₂ formado en Co₂P pudo considerarse impureza. Para clarificar más la influencia de Co(PO₃)₂ en detección H₂O₂, se investigaron propiedades electroquímicas de Co(PO₃)₂. Como se muestra en Archivo adicional 1: Fig. S6, Co(PO₃)₂ muestra respuesta electroquímica despreciable hacia H₂O₂ y su conductividad es inferior a Co₂P, lo que reduce la señal de corriente de Co₂P/ITO en prueba amperométrica. Por tanto, la mayor pureza y mejor cristalinidad de muestra Co₂P pueden contribuir a la mejora de rendimientos de detección. Así, elegimos la muestra Co₂P preparada a 200 °C y 12 h como mejor material de detección H₂O₂. La curva de calibración I–t también presenta buena relación lineal en concentración de 1,0–50 μM, el rango fisiológico de concentración H₂O₂ en biosistema (Fig. S7) [28], lo que podría ayudar a mejorar la posibilidad de aplicaciones prácticas de este sensor. Además, el límite de detección (LOD) del sensor H₂O₂ se calcula en 0,65 μM a relación señal-ruido de 3. Comparado con sensores H₂O₂ reportados previamente, los rendimientos electroquímicos integrales de nuestro transductor Co₂P/ITO son superiores a los con sensibilidad favorable, rango lineal y LOD, como se muestra en Tabla 1.

Tras detectar 1,0 mM H₂O₂ repetidamente por 35 veces (Fig. 3a, b), los espectros XPS en regiones Co 2p y P 2p de Co₂P se analizan para investigar más el mecanismo de detección. No hay cambio significativo en posición de picos en región P 2p antes y después de detección H₂O₂. Sin embargo, los picos a 778,2 y 793,0 eV en espectro Co 2p desaparecieron tras múltiples mediciones. Como el pico a 778,2 eV indica existencia de especies Co reducidas en muestra Co₂P [37], la desaparición de estos dos picos demuestra que las especies Co reducidas con baja valencia en Co₂P pueden ser oxidadas por H₂O₂ durante el proceso de detección, especialmente con alta concentración de H₂O₂. Los picos remanentes en región Co 2p (782,1 y 798,3 eV) se atribuyen a Co²⁺ 2p_3/2 y Co²⁺ 2p_1/2, respectivamente, sugiriendo existencia exclusiva de especies Co(II) en Co₂P tras múltiples mediciones. Según reportes previos sobre utilización de electrocatalizador basado en cobalto en detección H₂O₂, especies Co²⁺ se demuestran como sitios activos catalíticos para reducción H₂O₂ [46,47,48]. Generalmente, la reducción electroquímica de H₂O₂ pasa por dos pasos en PBS [49, 50], como se muestra a continuación.

$${\text{H}}_{{2}} {\text{O}}_{{2}} + {\text{ e}}^{ - } \to {\text{OH}}_{{{\text{ad}}}} + {\text{ OH}}^{ - }$$ (1)

$${\text{OH}}_{{{\text{ad}}}} + {\text{ e}}^{ - } \to {\text{OH}}^{ - }$$ (2)

$${\text{2OH}}^{ - } + {\text{ 2H}}^{ + } \to {\text{2H}}_{{2}} {\text{O}}$$ (3)

En el primer paso, H₂O₂ obtiene un electrón para formar OH⁻ adsorbido (OH_ad). Cuando el intermediario OH_ad obtiene un electrón adicional, el producto final de reducción de H₂O₂, H₂O, se genera. Como el potencial redox de H₂O₂/H₂O es mayor que Co³⁺/Co²⁺, las especies Co(II) en Co₂P pueden oxidarse a Co(III) en el proceso de transferencia electrónica y H₂O₂ se reduce a H₂O irreversiblemente. Durante la prueba amperométrica, el sesgo aplicado es −0,5 V versus Ag/AgCl (igual a 0,14 V vs. NHE), que es menor que el potencial redox estándar de Co³⁺/Co²⁺. Como resultado, el Co(III) oxidado puede reducirse a Co(II) y estos sitios activos catalíticos de Co(II) se regeneran de nuevo. Por tanto, se puede concluir que el ciclo catalítico de especies Co(II) tiene lugar durante detección electroquímica de H₂O₂ y las especies Co reducidas con baja valencia son oxidadas por H₂O₂ tras mediciones repetitivas.

Selectividad, Estabilidad, Reproducibilidad y Repetibilidad del Electrodo Co₂P/ITO

El rendimiento anti-interferencia es otra propiedad importante de biosensor. Nitrógeno de alta pureza se utilizó para evitar influencia de oxígeno disuelto en solución porque el oxígeno podría reducirse a potencial similar al aplicado en prueba amperométrica [51]. Comparando curvas CV de Co₂P/ITO en 0,1 M PBS con o sin purga de nitrógeno, el potencial de reducción y respuesta de corriente de 2,5 mM H₂O₂ son similares, como se muestra en Fig. S8, lo que sugiere que la interferencia de oxígeno disuelto puede despreciarse. La selectividad de Co₂P/ITO también se probó con sustancias comunes y otras moléculas pequeñas en fluido corporal, como sales inorgánicas, azúcares, aminoácidos y biomoléculas reductoras. Como se muestra en Fig. 4a, la respuesta de corriente tras añadir los interferentes anteriores puede despreciarse comparada con la respuesta de 1,0 mM H₂O₂. Como ambos dos átomos O de H₂O₂ podrían enlazarse con uno o dos átomos Co [52], la molécula H₂O₂ se adsorbería químicamente en especies Co(II) en Co₂P específicamente. Además, la interferencia de oxidación indiscriminada de algunos compuestos reductores en muestras biológicas reales a alto potencial también puede reducirse significativamente a potencial de sesgo negativo [53]. Por tanto, la selectividad favorable de Co₂P hacia H₂O₂ beneficia principalmente de las especies Co(II) como sitios de adsorción específicos y el potencial de sesgo negativo aplicado durante el proceso de detección.

Además, la estabilidad, reproducibilidad y repetibilidad del transductor Co₂P/ITO también se evaluaron. Las corrientes de pico de reducción de diez curvas CV sucesivas en 50 μM H₂O₂ se muestran en Fig. 4b. Tras diez ciclos, la corriente de pico del electrodo solo cayó 2,7%. Además, el sensor mantuvo aproximadamente 98,2% de su respuesta de corriente inicial tras almacenarse en aire por un mes (Fig. S9), demostrando estabilidad de detección ideal y durabilidad sobresaliente a largo plazo. La reproducibilidad electrodo-a-electrodo se investigó calculando la desviación estándar relativa (RSD) de respuestas de corriente H₂O₂. Para eliminar error potencial de fabricación de electrodo en lo posible, la densidad de corriente estable en presencia de H₂O₂ se resta por la señal de fondo inicial de cada electrodo individual y el valor de diferencia obtenido se considera como respuesta electroquímica de cada electrodo. Seis electrodos Co₂P/ITO se fabricaron bajo mismas condiciones para experimentos controlados y el RSD de respuestas de corriente fue 1,24%, como se muestra en Fig. 4c, indicando reproducibilidad relativamente excelente de Co₂P/ITO. Mientras tanto, la repetibilidad se midió en un electrodo detectando 1,0 mM H₂O₂ ocho veces, y se logró RSD de 1,14% (Fig. 4d). Los resultados anteriores ilustran la satisfactoria estabilidad, reproducibilidad y repetibilidad del electrodo para detección electroquímica no enzimática de H₂O₂.

Conclusión

En resumen, Co₂P NPs se sintetizaron exitosamente por método hidrotérmico. Además, las Co₂P NPs preparadas a 200 °C por 12 h han demostrado ser catalizador eficiente hacia reducción electroquímica de H₂O₂ en PBS pH 7,4. Como sensor no enzimático de H₂O₂, el electrodo Co₂P/ITO mostró respuesta amperométrica rápida menor a 5 s, rango de respuesta más amplio de 0,001 a 10,0 mM y límite de detección bajo de 0,65 μM, así como selectividad, reproducibilidad y estabilidad satisfactorias. Este trabajo busca ampliar la investigación sobre aplicación de fosfuro de metal de transición en detección electroquímica de biomoléculas pequeñas y nuestro sensor Co₂P/ITO podría diseñarse como nueva plataforma no enzimática para detección de H₂O₂.