Nanopartículas Hidróxido Cobre Ligando-Dopadas: Estrategia Antimicrobiana Efectiva

Resumen

La resistencia bacteriana a terapias antimicrobianas es problema clínico creciente. Esto es tan cierto para aplicaciones tópicas como terapia sistémica. Tópicamente, iones cobre pueden ser antimicrobianos efectivos y baratos que actúan vía múltiples vías limitando oportunidades bacterias para resistencia. Sin embargo, química cobre no se presta a formulaciones fáciles que liberen iones cobre en pHs biológicamente compatibles. Aquí, desarrollamos nanopartículas hidróxido cobre adipato tartrato (CHAT) como material barato, seguro y fácilmente sintetizado que debería permitir liberación antimicrobiana iones cobre en entorno herida infectada.

Primero, sintetizamos CHAT y mostramos tamaños partícula acuados dispersos 2–5 nm y potencial zeta medio −40 mV. Luego, diluido en medio bacteriano, CHAT demostró eficacia similar a cloruro cobre contra Escherichia coli y Staphylococcus aureus, con actividad dependiente dosis ocurriendo mayormente alrededor 12.5–50 mg/L cobre. De hecho, a estos niveles, CHAT se disolvió muy rápidamente y, confirmado por biosensor cobre bacteriano, mostró carga intracelular idéntica a iones cobre derivados cloruro cobre. Sin embargo, formulado a 250 mg/L en matriz aplicada tópicamente, hidroxietil celulosa, beneficio CHAT sobre cloruro cobre fue aparente. El primero produjo liberación rápida sostenida cobre dentro rango bactericida, pero cloruro cobre, que formó precipitados insolubles a tal concentración y pH, logró liberación máxima 10 ± 7 mg/L cobre a 24 h.

Proporcionamos formulación práctica para terapia antimicrobiana tópica basada cobre. Estudios adicionales, especialmente in vivo, son merecidos.

Antecedentes

Infecciones microbianas contribuyen millones muertes globalmente [1]. A menudo, ineficiencia tratamiento antimicrobiano se debe resistencia microbiana antibióticos convencionales [2,3,4,5]. Como tal, nuevos antimicrobianos buscados ansiosamente. Cobre largo reconocido por efectos antimicrobianos y puede tener potencial mayor longevidad clínica que antibióticos estándar ya que actúa vía multiplicidad mecanismos contra bacterias, incluyendo interacción proteínas y ADN bacterianos, producción especies reactivas oxígeno (ROS), y disrupción integridad membrana [6, 7]. Por misma razón, se sugiere potencial resistencia antimicrobiana cepas patógenas bacterianas a cobre y otros metales es limitado [7,8,9]. Además, cobre relativamente barato y baja toxicidad humanos ya que su esencialidad niveles traza aseguró evolución control homeostático estricto [10,11,12]. Hay, por tanto, uso común este metal medidas prevención infección, mayormente evitar formación biopelícula bacteriana superficies áreas alto riesgo como hospitales y residencias ancianos [13, 14]. En contraste, cobre no hallado uso terapéutico significativo formulaciones antimicrobianas tópicas, a diferencia plata ampliamente empleada [15].

Bacterias susceptibles carga cobre en entorno intracelular, y efectividad fuente cobre relacionada su capacidad liberar iones cobre [16, 17]. En este respecto, desafío significativo antimicrobianos basados cobre es lograr formulación concentrada permita liberación sostenida cobre antimicrobiano concentraciones efectivas fluidos como exudado herida. Esto porque cobre ion hidrolítico y al aumentar concentración pH formulaciones tópicas típicas (i.e. cerca neutro), aumenta tendencia inducir hidrólisis y formar oxi-hidróxidos insolubles [18]. A pHs fisiológicos, estos oxi-hidróxidos no buenos sustratos liberación iones cobre solubles o, por tanto, potencialmente eficaces [16, 19, 20].

Recientemente, con propósito encontrar suplemento hierro biodisponible, problema liberación efectiva iones férricos fuente oxi-hidróxido concentrada bajo condiciones fisiológicas resuelto mediante modificación estructural partículas primarias. En ese trabajo, hierro precipitado presencia ligandos GRAS dopantes cristal, namely ácidos adípico y tartárico, para desestabilizar intencionalmente estructura final oxi-hidróxido férrico. Esta estrategia tuvo ventaja (a) prevenir aglomeración irreversible partículas oxi-hidróxido férrico y (b) aumentar grandemente labilidad (facilidad solubilidad) bajo condiciones fisiológicas apropiadas. Este material denominado "hierro [oxi-]hidróxido adipato tartrato" o IHAT [21, 22]. Por analogía, consideramos aquí si cobre [oxi-]hidróxido adipato tartrato (CHAT) podría sintetizarse y formularse altas concentraciones pero aún liberar iones cobre niveles antimicrobianos efectivos. En particular, objetivo este trabajo desarrollar proceso sintético barato y escalable produzca nanopartículas oxi-hidróxido cobre que, a diferencia materiales reportados previamente, liberen fácilmente concentraciones biocidas iones cobre en entorno herida simulado.

Así, en este estudio, sintetizamos CHAT y caracterizamos su capacidad entregar cobre biodisponible y, por tanto, demostrar actividad antimicrobiana. Nos centramos cepas Escherichia coli como especies "indicadoras" bacterias Gram-negativas [19, 23] pero adicionalmente demostramos efectos prueba-principio contra Staphylococcus aureus, como bacterias Gram-positivas que a menudo obtienen multirresistencia. Por tanto, estudio aimed evaluar valor desarrollar CHAT más para aplicaciones clínicas terapia antimicrobiana tópica.

Métodos

Salvo indicación contraria, todos experimentos realizados usando agua ultra-alta pureza (UHP) (purificación ósmosis inversa; 18.2 ΩM/cm), temperatura ambiente (20 ± 2 °C), y todos reactivos comprados Sigma Aldrich.

Formulaciones Cobre y Nanopartículas CHAT

Soluciones stock cloruro cobre (40 mM cobre) preparadas disolviendo CuCl₂·2H₂O en agua. Nanopartículas óxido cobre (CuO NPs; Sigma 544868) stocks preparadas polvo comercial libre impurezas, tamaño partícula primario 34 nm (rango 10–50 nm), y probado previamente agente antimicrobiano [24,25,26]. Estos stocks preparados 1.3 g/L cobre dispersando polvo en agua con agitación vigorosa. Suspensiones coloidales nanopartículas CHAT sintetizadas método co-precipitación [27]. Brevemente, cloruro cobre, ácido tartárico y ácido adípico disueltos agua lograr ratio molar cobre/ácido tartárico/ácido adípico en suspensión final 2:1:1 y concentración cobre 2.5 g/L. pH inicial mezcla siempre por debajo 2.5, y cobre totalmente solubilizado. pH luego aumentado lentamente adición gota a gota solución concentrada NaOH (5 M) con agitación constante hasta pH 8.2 ± 0.2.

Contenido Cobre y Distribución Fase Suspensiones CHAT

Contenido cobre suspensiones coloidales determinado por espectrometría emisión óptica plasma acoplado inductivamente (ICP-OES, Jobin Yvon 2000, Horiba). Todas muestras diluidas concentraciones por debajo 100 mg/L en 5% HNO₃ (v/v) al menos 24 h previo análisis asegurar solubilidad total cobre. Estándares calibración (0.1 a 100 mg/L cobre) matrix-matched 5% HNO₃, y cuantificación cobre realizada a 324.754 nm. Fraccionamiento cobre porcentajes cobre aglomerado, nanoparticulado y soluble logrado por filtración y ultrafiltración stocks CHAT. Suspensiones filtradas (corte 200 nm), y retentado considerado fracción aglomerada. Aislar cobre soluble distinguirlo nanoparticulado, suspensión coloidal ultrafiltrada filtro 3-KDa (Sartorius Vivaspin 500 VS0192; 16,000×g, 5 min) ya que corresponde corte por debajo 1 nm (Zetasizer Software 7.11, Malvern Instruments Ltd). Contenido cobre todas fracciones (total, 200 nm filtrado, 3 KDa ultrafiltrado) determinado ICP-OES, y fracciones expresadas porcentaje relación contenido total cobre:

$$ {\displaystyle \begin{array}{l}\%\mathrm{Soluble}\ \mathrm{Copper}\ \left(<1\mathrm{nm}\right)\%\kern0.5em =\frac{\kern0.5em {Cu}_{3\mathrm{KDa}}}{Cu_{\mathrm{Total}}}\times 100\\ {}\%\mathrm{Agglomerated}\ \mathrm{Copper}=\frac{\ {Cu}_{\mathrm{Total}}-{Cu}_{<200\mathrm{nm}}\kern0.5em }{Cu_{\mathrm{Total}}}\kern0.5em \times 100\\ {}\%\mathrm{Nanoparticulate}\kern0.5em \mathrm{Copper}\kern0.5em =100-\%\mathrm{Agglomerated}\ \mathrm{copper}-\%\mathrm{Soluble}\ \mathrm{copper}\end{array}} $$

Determinación Contenido Cobre y Ratios Cobre-Ligando Nanopartículas CHAT Secas

Nanopartículas CHAT aglomeradas y precipitadas para permitir recuperación y remoción componentes no unidos. Para permitir esto, etanol añadido suspensiones coloidales CHAT (2.5 g/L cobre) ratio 2:1 etanol/suspensión (v/v), y resultantes aglomerados CHAT recuperados centrifugación (4500×g × 15 min Mistral 6000). Fase solución, conteniendo especies ligando no unidas, descartada. Determinación contenido cobre fase sólida CHAT: polvo producido secado horno pellet etanólico precipitado peso constante 45 °C. Este molido y 35.2 ± 0.3 mg (n = 2) digerido en 11 ± 1 g 70% HNO₃, con pesos precisos registrados. Una vez totalmente digerido, solución diluida 20-veces agua y concentración cobre determinada ICP-OES. Ratios ligando-cobre determinados directamente CHAT aglomerados secos, etanol-precipitados. Aglomerados primero re-suspendidos agua volumen original facilitar disolución menores cantidades HCl —requisito cromatografía líquida alta rendimiento (HPLC) análisis. Alícuotas disueltas 5% HNO₃ para análisis ICP-OES cobre (como descrito arriba) o 80 mM HCl para análisis HPLC ligandos (ácidos tartárico y adípico). Análisis ligando realizado sistema cromatografía fase reversa estándar (columna C18 en Waters Alliance 2690/5 equipado detector 2998 PDA; detalles adicionales Archivo adicional 1).

Caracterización Fisicoquímica Suspensiones CHAT

Distribución tamaño partícula hidrodinámica determinada dispersión luz dinámica (DLS; Zetasizer NanoZS, Malvern Instruments Ltd). Alícuotas suspensiones coloidales CHAT (2.5 g/L cobre) transferidas cubeta desechable 1-mL, y mediciones (n = 3) realizadas 25 ± 2 °C. Potencial zeta suspensiones CHAT determinado micro-electroforesis Doppler láser (Zetasizer NanoZS, Malvern Instruments Ltd) usando capilares plegados desechables (DTS1070) asumiendo constante dieléctrica 78.5 y viscosidad 0.89 cP. Caracterización microscopía electrónica transmisión (TEM) realizada aplicando gota suspensión CHAT rejillas carbono perforado y secado 50 °C noche. Rejillas luego imaginadas TEM (FEI-Philips CM100) 120 kV modo campo brillante.

Actividad Antimicrobiana Formulaciones Cobre

Ensayos realizados medio MOPS metales pesados (HMM), medio reconocido compatible iones metálicos (Archivo adicional 3), suplementado 0.4% glucosa y 0.1% caseína hidrolizado ácido, y pH ajustado 7.2 ± 0.2 [28]. Previo adición compuestos cobre, Escherichia coli (NCTC11100) y Staphylococcus aureus RN4220 [29] crecieron noche a 30 °C bajo agitación constante incubadora Infors HT Minitron 80 rpm. Después, suspensiones bacterianas diluidas densidad óptica 0.05–0.1 (ca. 10⁶ células/mL) a 595 nm E. coli (Multiskan RC 351 Labsystem) o 600 nm S. aureus (Multiskan plate reader, ThermoFisher Scientific). Luego, stocks cloruro cobre y CHAT coloidal diluidos HMM y añadidos suspensiones bacterianas obtener concentraciones finales cobre entre 0.4 y 100 mg/L. Incubación tuvo lugar período 6 a 9 h, y crecimiento bacteriano determinado monitoreando densidad óptica medida biomasa bacteriana.

Solubilidad cobre tiempo en medio crecimiento bacteriano determinada diluyendo cloruro cobre y CHAT coloidal stocks HMM a 12.5, 25 y 50 mg/L cobre y determinando fracción cobre soluble a 0, 2, 4 y 8 h mediante ultrafiltración (3 KDa) y análisis ICP-OES, como descrito arriba.

Biodisponibilidad Intracelular Formulaciones Cobre

Bacterias bioluminiscentes recombinantes Cu-sensores, E. coli MC1061 (pSLcueR/pDNPcopAlux), que responden cantidades sub-tóxicas cobre biodisponible aumentando bioluminiscencia usados cuantificar biodisponibilidad compuestos cobre [30]. Suspensiones bacterianas preparadas como descrito ensayo actividad antimicrobiana e incubadas serie diluciones cloruro cobre y CHAT (0 a 50 mg/L cobre) en microplacas 96-pozos por 4 h. Bioluminiscencia medida luminómetro placa Orion II (Berthold Detection Systems), e inducción bioluminiscencia calculada:

$$ Bioluminiscencia\ inducción,\ Fold\ Change=\frac{ Bioluminiscencia\ en\ Cu\ exposición}{Bioluminiscencia\ sin\ Cu\ } $$

Estrés Intracelular Inducido Formulaciones Cobre

Capacidad compuestos cobre inducir aniones superóxido intracelulares y roturas cadena simple ADN evaluada bacterias bioluminiscentes recombinantes, E. coli K12::soxRSsodAlux y E. coli MC1061 (pDEWrecAlux), respectivamente [17]. Cultivos bacterianos preparados como descrito ensayo antimicrobiano, y bacterias expuestas serie diluciones cloruro cobre y CHAT (0 a 50 mg/L cobre) en microplacas 96-pozos blancas sobre 4 h. Rendimientos biosensores controlados exponiendo bacterias químico inductor anión superóxido menadiona (0.04–30 μg/L), o peróxido hidrógeno (0.1–150 mg/L), como controles positivos E. coli K12::soxRSsodAlux o E. coli MC1061 (pDEWrecAlux), respectivamente. De nuevo, bacterias incubadas microplacas 96-pozos blancas y bioluminiscencia medida luminómetro placa Orion II e inducción bioluminiscencia calculada Ec. 5.

Incorporación Formulaciones Cobre Geles Hidroxietil Celulosa

Stocks cloruro cobre, CHAT, y nanopartículas óxido cobre comerciales, no modificadas (CuO NPs) diluidas agua UHP a 250 mg/L cobre. Resultantes suspensiones CHAT y CuO NPs pH casi neutro e incorporadas directamente gel, pero solución cloruro cobre aún ácida tras dilución y por tanto ajustada pH 7.0 ± 0.2. Hidroxietilcelulosa (HEC) luego disuelta directamente (2% w/v) en varios stocks diluidos usando mezclador rodillo (Denley Spiramix 5) hasta geles homogéneos formados. Diez gramos cada gel transferidos tubos Falcon y permitidos asentar noche. Luego, 10 mL fresco tampón bicarbonato sodio 50 mM (disuelto NaHCO₃ polvo y ajustado pH 7.0 ± 0.2) transferidos cada tubo cuidado minimizar perturbaciones interfaz gel-líquido (área superficial específica 7.1 cm²). Alícuotas luego recolectadas y analizadas ICP-OES determinar liberación cobre tiempo.

Resultados

Como descrito sección "Métodos", CHAT sintetizado forma similar análogo hierro, IHAT [21, 22], dopando cobre oxi-hidróxido (2.5 g/L cobre) con ácidos tartárico y adípico. Esto produjo suspensiones coloidales estables en las que todo cobre pasó filtro 200-nm pero muy poco (5%) pasó filtro 3-KDa. Esto indicó mayor cobre nanoparticulado (95%; Fig. 1a) con poco cobre "libre" y sin aglomerados grandes detectables —otra vez como análogo IHAT [21, 22]. Cuando precipitado etanol, para remover especies ligando no unidas, y luego secado, CHAT contenía 31 ± 1% cobre (w/w) análisis ICP-OES. Ratios molares cobre-ligando, últimos determinados HPLC, fueron 2:1 cobre-tartrato y 2:0.3 cobre-adipato. Partículas CHAT aparecieron casi monodispersas diámetros 2–3 nm imagen TEM (Fig. 1b). Estos hallazgos consistentes datos tamaño hidrodinámico CHAT más capa hidratación ya que diámetro mediano volumen en agua UHP 3.4 nm (Fig. 1c) y distribución tamaño estrecha (2.4–5.6 nm 80% volumen) evaluada dispersión luz dinámica. Potencial zeta promedio −39 mV (Fig. 1d), consistente nanopartículas forman dispersión acuada estable [27], y, de hecho, stock suspensión CHAT mostrada estable varios años (Archivo adicional 4).

Luego, consideramos actividad antimicrobiana CHAT cuando stocks suspensiones diluidos medios crecimiento bacteriano concentraciones asociadas actividad antimicrobiana sales cobre. Para CHAT y cloruro cobre, curva inhibición crecimiento muy similar tanto E. coli como S. aureus con mayor actividad ocurriendo concentraciones totales cobre entre 12.5 y 50 mg/L rango (Fig. 2). Inhibición completa crecimiento E. coli observada incubación 18.8 (CuCl₂) y 25 (CHAT) mg/L cobre, mientras S. aureus, inhibición completa crecimiento obtenida 75 (CuCl₂) y 100 (CHAT) mg/L cobre (Fig. 2; Porcentaje inhibición crecimiento vs concentración cobre proporcionado Archivo adicional 5).

De hecho, a estas concentraciones antimicrobianas, al menos 94% CHAT solubilizó rápidamente (dentro 15 min), otra vez juzgado ultrafiltración y análisis ICP-OES (Fig. 3a). Por tanto, anticipamos efectividad antimicrobiana CHAT vinculada esta labilidad química, con disolución rápida nanopartículas permitiendo adquisición intracelular bacteriana iones cobre. Probar esto, desafiamos E. coli Cu-sensor, MC1061 (pSLcueR/pDNPcopAlux), en cual bioluminiscencia aumenta respuesta concentraciones sub-tóxicas iones cobre intracelulares [30], con 0 a 50 mg/L cobre como CHAT o cloruro cobre. Concentraciones crecientes medio cultivo ambas fuentes cobre llevaron bioluminiscencia creciente en cepa E. coli sensor cobre (Fig. 3b), consistente con aumentos cobre intracelular. Pendiente curva dosis-respuesta idéntica hasta 6.25 mg/L ambas fuentes cobre confirmando cobre biodisponible CHAT comparable fuente totalmente solubilizada. Posteriormente, concentraciones hasta 50 mg/L cobre, luminiscencia no aumentó debido toxicidad ambos compuestos cobre (Fig. 3b).

Paralelo estudio cobre intracelular E. coli expuesto soluciones preparadas CHAT o cloruro cobre, también probamos capacidad estas soluciones desencadenar aniones superóxido intracelulares o causar daño ADN bacteriano en diferentes biosensores basados E. coli. En ningún caso hubo efecto significativamente observable, a pesar sensores respondiendo controles positivos relevantes, namely peróxido hidrógeno y menadiona, respectivamente (Fig. 3c, d). Juntos, respuestas equivalentes tres biosensores bacterianos soluciones preparadas diferentes formas químicas cobre fuertemente apoyan noción que, en ambos casos, bacterias expuestas mismo cobre soluble, a pesar una formulación comenzando nanoparticulada.

Finalmente, como notado arriba, ventaja CHAT sobre sales cobre solubles solo aparente si formulación concentrada permitió primero retener labilidad química a diferencia segundo. Usando hidroxietil celulosa (HEC), base acuosa común formulaciones tópicas [31,32,33], incorporamos 250 mg/L cobre como cloruro cobre, CHAT, o NPs CuO comerciales. Cuando 10 mL 50 mM NaHCO₃ tampón, como exudado herida simplificado, añadidos 10 g cada gel HEC incorporado cobre (i.e. 2.5 mg cobre), hubo liberación sostenida cobre preparación contenedora CHAT, a mayor 60 mg/L a 24 h (Fig. 4). Además, liberación relativamente rápida con concentraciones antimicrobianamente activas logradas 2–4 h. En contraste, cloruro cobre pH-neutralizado pobre sustrato liberación cobre, como anticipado por su tendencia hidrolizar y formar aglomerados oxi-hidróxidos cobre, así a 24 h, solo 10 ± 7 mg/L cobre logrado en solución (Fig. 4). NPs CuO comerciales no produjeron liberación cobre discernible (Fig. 4).

Discusión

Mostramos aquí nanomaterial basado cobre, namely CHAT, puede formularse altas concentraciones, a diferencia nanopartículas basadas cobre descritas previamente [34, 35], reteniendo propiedades fuente lable cobre biodisponible con eficacia antimicrobiana. Como notado arriba, síntesis CHAT inspirada tras muchos años trabajo previo análogo hierro, IHAT [21, 22]. Esto, a su vez, inspirado por solución naturaleza recambio mineral rápido in vivo, para reciclaje eficiente iones metálicos esenciales, whereby moléculas orgánicas usadas desestabilizar estructura cristalina partículas minerales primarias [21, 22]. En versiones sintéticas, ligandos GRAS incorporados metal oxi-hidróxidos forman en solución desde polímeros entrecruzados [21, 22]. Through desestabilización estructural, esto asegura labilidad fase mineral final y también genera nanopartículas altamente negativas —demostrado medición potencial zeta— que repelen aglomeración y agregación, produciendo suspensiones nanopartículas estables años. Aquí, y como mostrado previamente IHAT, tartrato fue ligando dominante logrando estos cambios fisicoquímicos estructura cobre oxi-hidróxido ya que incorporación ca. 3-veces mayor que adipato —este comportándose más como tampón durante síntesis [21, 22].

Ausencia modificación, metal oxi-hidróxidos recién precipitados aglomerarán y agregarán y empezarán envejecer, whereby condensan y gradualmente aumentan cristalinidad. Estas transiciones tamaño y fase mineral reducen capacidad estructuras participar reacción inversa, i.e. re-disolverse. Fue por tanto no sorprendente que cuando cobre oxi-hidróxido formado recién, desde neutralización pH solución cloruro cobre, al menos algo cobre soluble liberado en nuestro ensayo liberación gel (Fig. 4), mientras para NPs CuO comerciales, que estaban aglomeradas y comprendían fase mineral más condensada (i.e. óxido cobre), indetectable cobre liberado. Falta disolución comerciales nanopartículas 30 nm —que, independientemente estado agregación, presentarían gran área superficial disolución— muestra fase mineral conductor clave liberación iones cobre y que, como notado arriba, modificación partículas primarias mineral, lograda aquí dopaje ligando, realmente requerida provocar cambio marcado características disolución. Además, síntesis CHAT realizada temperatura ambiente, ya que temperatura sintética alta favorece fases menos amorfas que consecuentemente pueden reducir tasas disolución. También, síntesis temperatura ambiente beneficia reduciendo costos energéticos manufactura escala.

Aunque puede haber otras formas formular altas concentraciones estables cobre permitan liberación sostenida y disolución rápida iones cuando requerido, no vislumbramos otra síntesis tan directa y costo bienes (reactivos) tan bajo. Estos factores importantes ya que problema infecciones tópicas y resistencia bacteriana no restringidos países desarrollados. Países desarrollo cada vez más afligidos problemas resistencia bacteriana y soluciones asequibles eficaces urgentemente requeridas [36, 37]. Aunque estudios insuficientes alcanzar soluciones concretas, hay evidencia resistencia iones metálicos tóxicos más difícil bacterias lograr que resistencia antibióticos convencionales [7]. Teoría predica idea cobre y plata probablemente no tienen vías discretas actividad antimicrobiana sino, más bien, pueden impactar múltiples blancos incluyendo varios sistemas enzimáticos y así desestabilizar estructura general célula bacteriana [17, 19, 38]. De hecho, mostrado bacterias permanecen susceptibles cobre y ciertos iones metales a pesar exposiciones siglos [6, 7, 39]. Interesantemente, evidencia reciente antimicrobianos basados metales pueden incluso restaurar sensibilidad bacteriana antibióticos convencionales a pesar resistencia previa [40, 41].

Conclusiones

Aquí, demostramos problema iones cobre biodisponibles, a pHs fisiológicos y altas concentraciones, puede resolverse dopando nanomineral cobre con ácidos orgánicos, estrategia similar utilizada previamente análogos hierro [21, 22]. Estas nanopartículas basadas cobre (denominadas CHAT) disolvieron fácilmente medio bacteriano, mostrando captación intracelular cobre equivalente y actividad antibacteriana sales cobre solubles. Críticamente, sin embargo, y a diferencia sales cobre simples, CHAT puede concentrarse formulación pH-neutro y retener labilidad liberación iones cobre. De hecho, CHAT liberó iones cobre dentro rango bactericida y podría base nuevo agente antimicrobiano tópico novel ya sea solo o realzando eficacia antibióticos resistentes. Con creciente resistencia antibióticos, nuevos antimicrobianos tópicos necesarios y CHAT barato, fácilmente sintetizado, y usa componentes generalmente reconocidos seguros (GRAS). Estudios in vivo merecidos.

Abreviaturas

CHAT:

Nanopartículas cobre [oxi]-hidróxido adipato tartrato

CuO NPs:

Nanopartículas óxido cobre

DLS:

Dispersión luz dinámica

Escherichia coli:

E. coli

GRAS:

Generalmente reconocidos seguros

HEC:

Hidroxietilcelulosa

HMM:

Medio MOPS metales pesados

HPLC:

Cromatografía líquida alta rendimiento

ICP-OES:

Espectrometría emisión óptica plasma acoplado inductivamente

IHAT:

Nanopartículas hierro [oxi]-hidróxido adipato tartrato

MOPS:

3-(N-morfolino) propanosulfónico ácido

Staphylococcus aureus:

S. aureus

UHP:

Ultra-alta pureza